Um novo estudo pré-clínico publicado na Cancer Biology & Medicine apresenta uma plataforma de expansão de linfócitos infiltrantes de tumor (TIL) livre de feeder que reduz significativamente a dependência de altas doses de interleucina-2 (IL-2), uma das principais fontes de toxicidade na terapia com TIL. O estudo, conduzido por uma equipe conjunta do Departamento Sênior de Oncologia do Hospital Geral do Exército de Libertação Popular da China e da Shanghai Juncell Therapeutics, demonstra que este protocolo gera consistentemente TILs funcionais em múltiplos tipos de tumores sólidos, incluindo melanoma, câncer de pâncreas, estômago, colo do útero e colorretal.
A terapia convencional com TIL, validada clinicamente com a recente aprovação da FDA do lifileucel para melanoma avançado, ainda enfrenta obstáculos substanciais. O processo padrão de expansão depende de altas concentrações de IL-2 (3.000-6.000 UI/mL) e células feeder, como células mononucleares do sangue periférico irradiadas. Essa abordagem não apenas complica a fabricação, mas também promove exaustão das células T e exige administração sistêmica pós-infusão de altas doses de IL-2, o que acarreta riscos significativos de toxicidade. Além disso, mecanismos de evasão imune tumoral, incluindo a regulação negativa de MHC-I, prejudicam ainda mais o reconhecimento de células T CD8+ e limitam a eficácia terapêutica.
Os pesquisadores projetaram um protocolo de expansão em duas fases que elimina completamente as células feeder. Durante o pré-protocolo de expansão rápida (pré-REP), os TILs foram cultivados com baixa concentração de IL-2 (2.000 UI/mL) suplementada com IL-7 e IL-15. O subsequente protocolo de expansão rápida (REP) usou uma concentração ainda menor de IL-2 (300 UI/mL) juntamente com coestimulação de CD3/CD28. Este sistema livre de feeder alcançou taxas de sucesso de expansão de pelo menos 90% em múltiplos tipos de tumor, com TILs derivados de melanoma expandindo-se aproximadamente 2.500 vezes. Os produtos de TIL resultantes demonstraram alta pureza (células CD45+CD3+ >93%) e potente atividade citotóxica, secretando interferon-gama (IFN-γ) substancial e exibindo morte de células tumorais dependente da razão efetor-alvo. Notavelmente, os TILs expandidos exibiram características consistentes com um fenótipo menos exausto, incluindo expressão mínima de PD-1 (<0,5%) e uma composição predominantemente de células T de memória efetora.
Em um modelo de xenoenxerto derivado de paciente (PDX) de câncer colorretal, a adição de bloqueio de PD-1 em baixa dose (2 mg/kg) à terapia com TIL reduziu significativamente o volume tumoral em comparação com o grupo controle (P = 0,002) e manteve pesos corporais mais altos, enquanto preveniu completamente a ulceração tumoral — uma complicação observada nos grupos apenas com TIL e controle. Os pesquisadores também exploraram a hidroxicloroquina (HCQ) como agente imunomodulador; a HCQ aumentou significativamente a expressão de MHC-I em células tumorais in vitro sem afetar os níveis de PD-L1 ou prejudicar a proliferação de TIL, e melhorou a morte tumoral mediada por células T de TCR-T em fase inicial.
"Nosso objetivo foi eliminar a dependência da terapia com TIL de altas doses de IL-2, que tem sido uma grande barreira para um uso clínico mais amplo", disseram os autores. "Ao criar um sistema livre de feeder com suporte de citocinas cuidadosamente calibrado, mostramos que podemos gerar TILs funcionais e menos exaustos a partir de múltiplos tipos de tumor. A adição de bloqueio de PD-1 em baixa dose não apenas aumentou a eficácia antitumoral, mas também melhorou a tolerabilidade do tratamento."
As descobertas têm implicações significativas para o futuro da imunoterapia baseada em TIL. Ao eliminar células feeder e reduzir as doses de IL-2, o protocolo simplifica a fabricação e pode reduzir os custos de produção, potencialmente tornando a terapia com TIL mais acessível além de centros de tratamento especializados. A demonstração de que o bloqueio de PD-1 em baixa dose pode servir como uma alternativa ao suporte de altas doses de IL-2 pós-infusão aborda uma grande preocupação de segurança, já que os inibidores de PD-1 são amplamente utilizados na prática clínica com perfis de segurança bem caracterizados. Esta estratégia independente de IL-2 já foi explorada em um ensaio clínico para cânceres ginecológicos avançados com sinais de segurança favoráveis precoces. Pesquisas futuras precisarão validar estas descobertas em modelos animais maiores e em diversos tipos de tumor, e investigar os mecanismos subjacentes de persistência de TIL e modulação do microambiente tumoral. Se confirmado em estudos clínicos, esta abordagem poderia expandir o alcance da terapia com TIL para uma população mais ampla de pacientes com tumores sólidos que atualmente têm opções de tratamento limitadas.
O estudo foi publicado sob o DOI 10.20892/j.issn.2095-3941.2025.0441. Cancer Biology & Medicine é um periódico de acesso aberto revisado por pares, patrocinado pela Associação Anticâncer da China e pelo Instituto de Câncer e Hospital da Universidade Médica de Tianjin, indexado no SCOPUS, MEDLINE e SCI (IF 12.4).
