Pesquisadores descobriram um circuito supressor tumoral anteriormente não reconhecido que governa o comportamento semelhante ao de células-tronco no carcinoma hepatocelular (CHC), a forma mais comum de câncer primário de fígado. O estudo, liderado por cientistas da Universidade de Okayama, no Japão, e publicado (DOI: 10.20892/j.issn.2095-3941.2025.0247) na Cancer Biology & Medicine, revela que a proteína SPRED2 se liga ao supressor tumoral p53, entra no núcleo e ativa a transcrição do microRNA miR-506-3p. Esse microRNA então tem como alvo direto o RNA mensageiro do KLF4, reduzindo os níveis da proteína KLF4 e diminuindo características de células-tronco cancerígenas (CSC), como formação de esferas, crescimento de colônias, invasão e atividade da aldeído desidrogenase (ALDH).
Os achados são significativos porque o câncer de fígado é o quinto câncer mais comumente diagnosticado e a segunda principal causa de morte por câncer em todo o mundo. O CHC representa 70–85% dos cânceres primários de fígado, e sua taxa de recorrência em cinco anos pode chegar a 70–80%. As células-tronco cancerígenas, uma população pequena mas agressiva, impulsionam recidiva, metástase e resistência à quimioterapia. Sabe-se que o SPRED2 inibe a sinalização Ras/Raf/ERK-MAPK e está downregulado em cânceres avançados, incluindo o CHC. Trabalhos anteriores associaram a perda de SPRED2 a níveis mais altos de fatores de pluripotência como Nanog, c-Myc e KLF4, mas como o SPRED2 controla a stemness do CHC permanecia obscuro.
Para mapear a via, a equipe usou linhagens celulares de CHC HepG2, HLE e Hep3B, células deficientes e superexpressando SPRED2, um modelo de xenotransplante em camundongos e 40 amostras humanas pareadas de CHC. Eles combinaram Western blot, RT-qPCR, co-imunoprecipitação, imunoprecipitação de cromatina seguida de PCR quantitativo, ensaios de luciferase e imunofluorescência. Amostras clínicas validaram os achados celulares e em camundongos. KLF4 emergiu como o fator-chave de pluripotência: seu knockdown reduziu a formação de esferas e colônias, invasão, transição epitélio-mesenquimal, atividade de ALDH e a porcentagem de células CD44+ e CD90+, e produziu tumores menores em camundongos. O knockdown de KLF4 também diminuiu Nanog e c-Myc, enquanto o knockdown de Nanog ou c-Myc não afetou KLF4, colocando KLF4 a montante. A superexpressão de SPRED2 reduziu KLF4, c-Myc e Nanog, enquanto o knockout de SPRED2 os aumentou.
Mecanisticamente, o miR-506-3p ligou-se diretamente à região 3′ não traduzida do mRNA do KLF4. Nas 40 amostras humanas de CHC, KLF4 e miR-506-3p estavam negativamente correlacionados, enquanto SPRED2 e miR-506-3p estavam positivamente correlacionados. SPRED2 formou um complexo nuclear com p53; p53 apoiou a localização nuclear de SPRED2 e ligou-se ao promotor do miR-506. SPRED2 aumentou o miR-506-3p de maneira dependente de p53 e dependente da dose. A inibição de ERK e STAT3 também elevou o miR-506-3p, ligando três vias à supressão de KLF4. O mimético de miR-506-3p reduziu a formação de esferas e colônias e a atividade de ALDH, enquanto seu inibidor as aumentou. Em contraste, a expressão de SPRED2 não foi alterada pelo miR-506-3p, colocando SPRED2 a montante do microRNA.
Os autores afirmaram que os achados revelam um circuito supressor tumoral anteriormente não reconhecido ligando SPRED2 a p53 e à regulação de microRNA. Eles disseram que SPRED2 não age apenas bloqueando a sinalização ERK ou STAT3; ele também ajuda p53 a impulsionar o miR-506-3p, que então mantém KLF4 sob controle. Esse eixo pode explicar por que a perda de SPRED2 promove comportamento semelhante ao de CSC e pode oferecer um novo alvo para terapias destinadas a reduzir a stemness do CHC. Como a indução de miR-506-3p impulsionada por SPRED2 exigiu p53 funcional, a abordagem pode ser mais relevante para tumores com sinalização de p53 intacta; células de CHC com p53 mutante ou ausente podem precisar de estratégias adicionais. Estudos futuros devem testar miméticos de miR-506-3p, agentes estabilizadores de SPRED2 ou terapias combinadas em modelos pré-clínicos e definir quais pacientes têm maior probabilidade de se beneficiar. Tais trabalhos poderiam ajudar a traduzir esse eixo recém-definido em abordagens de precisão para o CHC.
A pesquisa foi apoiada em parte pela Sociedade Japonesa para a Promoção da Ciência (Subsídios nº 25293095, 90264283 e 22K19562). O estudo completo está disponível na Cancer Biology & Medicine, uma revista de acesso aberto indexada no SCOPUS, MEDLINE e SCI, com textos completos livremente visíveis para clínicos e pesquisadores em todo o mundo via http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/journals/2000/.
